Testiranje na retrovirus

Metode detekcije

Principi metoda

Regulatory Focus

Cocultivation Assay

Ova metoda koristi osjetljive indikatorske ćelije za hvatanje infektivnih virusnih čestica i određuje status kontaminacije promatranjem fenomena kao što su citopatski efekti, fokalna formacija ili ekspresija specifičnog antigena. Može pokazati prisustvo infektivnih retrovirusnih čestica.

• Obavezni ciljevi testiranja: EOPC ćelije ili proizvodne{0}}ograničene prolazne ćelije.

• Osnovna procedura testiranja: mora se koristiti dvostepeni sistem ko-kokulture (faza amplifikacije virusa i faza indikatora aktivnosti).

• Zahtevi za osetljivim ćelijama: U zavisnosti od vrste i porekla ćelija koje se testiraju, različite ili višestruke osetljive ćelijske linije moraju se koristiti za testove retrovirusne infektivnosti.

• Zahtjevi za prenošenje kulture: Sistem ko-kokulture mora se proći najmanje 5 puta (obično više) kako bi se osiguralo adekvatno pojačanje potencijalnog virusa.

Transmisiona elektronska mikroskopija

Ova metoda koristi transmisijsku elektronsku mikroskopiju visoke-razlučivosti za direktno promatranje morfologije i strukture virusnih čestica (kao što je tipična ikosaedralna struktura omotača i morfologija nukleokapsida), omogućavajući vizualnu identifikaciju i kvantitativnu analizu. Može otkriti poznate i nepoznate virusne čestice, uključujući čestice koje se ne-repliciraju ili one koje nisu zahvaćene testovima infektivnosti.

• Obavezni ciljevi testiranja: EOPC ćelije ili proizvodne{0}}ograničene prolazne ćelije.

• Osnovni zahtjev: Vrsta i količina retrovirusnih čestica moraju biti identificirani.

• Zahtjevi za uzorke: potrebno je ultratanke preseke, koje obično zahtijevaju sistematsko posmatranje najmanje 200 ćelija.

• Posebne odredbe (Kineska farmakopeja 2025): Za određene ćelije glodara (npr. CHO, BHK-21) ili ćelije insekata, takođe treba odrediti količinu virusnih čestica u tečnosti za žetvu i njihovu infektivnost.

Test reverzne transkriptaze

Na osnovu karakteristike reverzne transkriptaze koja katalizira sintezu DNK iz RNA šablona, ​​prisustvo retrovirusa može se indirektno odrediti detekcijom radioaktivnih ili fluorescentnih signala produkta reakcije kako bi se kvantifikovala aktivnost enzima. Ova metoda je nezavisna od virusne infektivnosti i može široko pregledati virusne čestice sa enzimskom aktivnošću.

• Objašnjenje izuzeća: I ICH Q5A(R2) i Kineska farmakopeja (izdanje 2025.) jasno navode da ovaj test nije potreban za ćelije za koje se zna da proizvode retroviruse (kao što su određene ćelije glodara, insekata i ptica).

• Alternativni zahtjevi: U slučajevima izuzeća, mora se izvršiti sveobuhvatniji test za tip, količinu i infektivnost virusnih čestica.

PCR ili druge specifične in vitro metode

Na osnovu specifičnosti vrste ćelija, kada su rezultati aktivnosti reverzne transkriptaze nejasni ili se ne mogu izmjeriti, mogu se koristiti{0}}specifične metode detekcije retrovirusa, kao što su retrovirusni PCR, imunofluorescencija, ELISA, itd. Kvantitativni PCR retrovirusa se također može koristiti za kvantifikaciju čestica retrovirusa.

• Primarno pozicioniranje: Obično se koristi kao važan dodatak gore navedenim osnovnim metodama i alat za potvrđivanje specifičnosti.

• Scenariji primjene: Obično se koriste za visoko osjetljivo otkrivanje i kvantifikaciju specifičnih poznatih virusa (npr. qPCR) ili za pružanje dokaza na molekularnom-nivou kada su rezultati infektivnosti/elektronske mikroskopije upitni.

• Regulatorna osnova: Njegova primjena zahtijeva temeljnu validaciju i mora biti u skladu sa relevantnim smjernicama za validaciju specifičnih metoda detekcije na ciljnom tržištu (npr. Kineska farmakopeja (izdanje 2025.)).

Profesionalne usluge

Sveobuhvatna zaštita za vas

Globalni pristup usklađenosti

Naše metode testiranja su duboko integrirane s osnovnim zahtjevima ICH Q5A(R2), Kineske farmakopeje (2025.), USP-a i EP-a, pružajući uslugu na jednom mjestu koja pokriva testiranje na infektivnost, transmisijsku elektronsku mikroskopiju (TEM) i otkrivanje aktivnosti reverzne transkriptaze, efikasno podržavajući višestruke istovremene aplikacije u SAD-u i Evropu.

Mogućnost detekcije širokog spektra

Imamo niz osjetljivih ćelijskih linija i zrelih metoda za različite scenarije rizika, koji mogu učinkovito otkriti ciljne patogene uključujući mišje retroviruse, retroviruse tropizma i retroviruse insekata, osiguravajući širok spektar i specifičnost detekcije.

Vlastita platforma za elektronski mikroskop

Imamo vlastiti transmisioni elektronski mikroskop-visoke rezolucije i viši profesionalni tehnički tim za postizanje zatvorene{1}}kontrole kvaliteta kroz cijeli proces od pripreme uzorka do izlaza podataka. Također možemo pružiti brze kvantitativne usluge za sirovine (UPB) kako bismo precizno podržali daljnju verifikaciju uklanjanja virusa.

Sveobuhvatna validacija metode

Sve metode se izvode u skladu sa GMP/GLP standardima, striktno poštujući Kinesku farmakopeju (izdanje 2025.) i ICH Q2(R2) za sveobuhvatnu validaciju specifičnosti, ograničenja detekcije, itd. Pružamo puni{4}}upravljanje projektima od dizajna protokola do podrške aplikacijama, osiguravajući usklađenost podataka i pouzdanost.

Zaštita integriteta podataka

Od prijema uzorka i izvođenja eksperimenta do izdavanja izvještaja, uspostavili smo kompletan sistem kvaliteta koji je u skladu sa GMP i ALCOA+ principima. Kroz profesionalni više-pregled podataka na više nivoa i mehanizam robusne kontrole odstupanja (CAPA), u osnovi osiguravamo visok-kvalitet i isporuku koja se može revidirati za svaki projekat.